发表核心期刊神经再支配和不同部位供皮

　　关键词: 发表核心期刊,失神经皮肤,神经再生,神经再支配

　　摘 要:目的 研究不同类型的移植皮肤在获得神经再支配后的表现. 方法 猴手指皮肤造成失神经支配并植入神经，于术后12mo取指腹标本利用免疫组织化学染色技术观察游离末梢和感觉小体再生情况. 结果 术后12mo移植皮肤内再生的游离神经末梢数量与正常无差异，分布均匀.植入的神经能再生触觉小体，且小体多分布于植皮区的边缘，体积为正常组58%，相对灰度为正常组80%，主要呈单轴突支配;各类皮肤中触觉小体的再生率不同，上睑、前臂、手掌的再生率分别是35%，40%，60%.未发现环层小体的再生. 结论 移植皮肤可再生游离末梢，触觉小体的再生率与皮片供区有关.

　　0 引言

　　移植皮片能获得神经的再支配，但末梢器官的再生是否与移植皮肤类型有关，一直是有争议的问题[1] .我们在神经植入术的模型中已经证实，植入的神经可以再生出各类感觉末梢[2，3] .我们利用此模型，观察不同类型(有毛和无毛)皮肤移植后，植入神经末梢在皮片内的再生情况，以便进一步认识感觉神经植入后的再生机制.

　　1 材料和方法

　　1.1 动物及分组 选用本校实验动物中心提供的健康恒河猴1只，雌性，体重5.5kg，将猴左手的示、中、环指作神经植入，右手作不同部位皮肤来源的全厚皮移植，拇指和小指为正常对照.均观察12mo.

　　1.2 模型制备 猴平卧，氨胺酮肌注麻醉(5mg・kg-1 )，静脉补液，持续给氧.放大镜下，在手背近侧切断尺神经手背支和桡神经浅支主干，并各切除1.0cm，两神经之近断端返折，缝合固定，造成手背和指背失神经支配.

　　1.3 各组手术方法 A组:作指掌侧皮瓣，将备用神经顺向全程植入切口，神经末端用8/0尼龙线固定于指腹中央，间断缝合皮下组织切口，原位缝合皮瓣.B组:作神经植入同时，全层切除各实验手指指腹皮肤约1.0cm×0.6cm，形成受区.自上睑、前臂远端和手掌侧切取1.0cm×0.6cm的全厚皮，移植至受区，打包包扎.C组:为手指正常皮肤，不进行任何手术. 1.4 标本切取及处理 手术后12mo，氯胺酮麻醉动物，开胸后用500ml生理盐水和40mL・L-1 多聚甲醛2000ml左心室灌注约2h，切取指腹标本，1.0cm×1.0cm的全层皮肤(含植入的神经).将标本放于40mL・L-1 多聚甲醛中后固定0.5h，入200g・L-1 蔗糖液中，隔夜.做50μm的冰冻切片，采用免疫组织化学ABC方法进行神经微丝抗体(NF)染色. 1.5 光镜观察及电子计算机图像分析 在光镜下观察并利用Q570图像分析系统(德国徕卡公司)对冰冻切片的免疫组化结果进行感觉小体灰度和体积大小的测量.

　　触觉小体的再生率:乳头内再生的触觉小体数/乳头总数

　　2 结果

　　2.1 单纯植入神经组 术后12mo游离神经末梢的数量与正常无差异，分布均匀(Fig1)，再生的触觉小体形态接近正常(Fig2)，体积为正常的72%，相对灰度达到正常的79%.板层结构清楚，神经盘旋卷曲，此时多为多轴突支配，乳头内触觉小体数/乳头总数约90%.

　　2.2 神经植入+皮肤移植组 各类皮片中游离末梢的分布与正常组及单纯植入神经组无差别.再生的触觉小体多分布于植皮区的边缘，体积稍小，为正常组的58%，相对灰度为正常组80%，主要呈单轴突支配，小体内有神经丝卷曲，但无典型的板层样结构(Fig3).同时，各类皮肤中触觉小体的再生率不同，上睑、前臂、手掌为供区的移植皮肤中再生率分别是35%，40%，60%.未发现环层小体的再生.

　　图1 -图3 略

　　2.3 正常皮肤对照组 真皮乳头内含有触觉小体约95%.小体呈现圆柱或椭圆形，受一根或多根轴突支配，其中以多轴突支配为主约70%.轴突自小体尾端进入后，神经丝盘旋卷曲呈现螺旋状，其间可见平等排列的板层样结构.表皮及真皮下的深、浅层可见分布广泛且均匀的神经纤维和神经末梢.

　　3 讨论

　　皮肤移植后能够再生出游离神经末梢，已经得到了人们的证实，但是各种感觉小体能否再生，却一直存在争议[4，5] .通常情况下，皮片移植后感觉功能的恢复是有限的，失神经受区移植皮片后感觉功能的恢复就更差[6] .随着人们对感觉功能重要性特别是手、足等部位感觉的重建的认识，选择一种实用、有效的周围神经修复术，成为各国学者努力的方向，神经植入术正是在这样的背景下应运而生的.为使临床上失神经区移植皮片后获得较佳的感觉恢复效果，我们将神经植入失神经皮肤移植区，结果显示:移植到猴手指指腹神经植入区的全厚皮，无论是有毛还是无毛，均能再生出较正常的游离末梢和触觉小体，尽管再生的小体多出现在移植区边缘，体积偏小，相对灰度低于正常，但神经植入术的应用将有利于皮片移植后感觉功能的恢复，特别是失神经区的感觉重建.

　　实验中发现小体的再生率因皮片供区的不同而异，即不同类型的皮片移植到神经植入区后，感觉功能的恢复有一定差别.其中以手掌为供区的移植皮片触觉小体的再生率最高(60%)，这可能是因为触觉小体在各类皮肤中所占比例不同造成的，即失神经皮肤植入神经后再生的各类末梢受皮肤类型的影响.虽然本实验中没有发现环层小体的再生，但尚不能否定其再生的可能性.其一，环层小体多位于真皮深层及皮下组织中，而我们移植的是全厚皮不可能带更多的皮下组织;其二，观察手段有待改进.电镜超微结构和电生理功能的研究(待发表)，将使我们更深入地认识感觉神经植入术后感觉恢复的机制.

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